間接膽紅素(IBIL)ELISA檢測試劑盒操作原理，種屬：小鼠

實(shí)驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被小鼠間接膽紅素（IBIL）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠間接膽紅素（IBIL）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長(cháng)下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

小鼠間接膽紅素(IBIL)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Mouse IBIL ELISA Kit 實(shí)驗類(lèi)型：夾心法 檢測范圍：0.25 μmol/L – 8 μmol/L 低檢測限：0.1 μmol/L 應用范圍：血清、血漿、組織勻漿、細胞培養物上清或其它相關(guān)液體（本產(chǎn)品僅供實(shí)驗室科研及非臨床用途）

小鼠間接膽紅素(IBIL)ELISA試劑盒組成

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。